随着对衰老、生物医学研究以及肿瘤和慢性病管理的不断深入,线粒体DNA(mtDNA)渐渐成为备受关注的生物标志物。为了响应这一趋势,上海翼和应用生物技术有限公司在分子诊断领域积累了多年的经验,推出了全新的MtDNAcn50检测试剂盒。该产品采用“双色荧光qPCR+绝对定量”的核心技术,为细胞及血清中游离mtDNA的拷贝数检测提供了高效、稳定且可重复的解决方案。
产品亮点
1. **双色荧光探针(FAM+HEX)**:该技术允许在同一孔中同步扩增线粒体基因与核基因内参,从而实现单孔双检,省时省样。
2. **绝对定量,结果更可信**:结合已知拷贝数标准品A和校正品B,构建双标准曲线,校正批次差异,实现准确的绝对定量。
3. **广泛样本适配**:本试剂盒适用于细胞gDNA以及血清/血浆中的游离DNA,能够满足衰老、代谢、肿瘤等领域的研究需求。
4. **GMP级生产,批批质控**:严格按照GMP规范进行生产,确保每批试剂盒在功能性质检上都符合标准,从而保证稳定性。
性能数据
• 扩增效率:95–105%
• 重复性:CV < 5%
• 线性范围:10^1–10^6拷贝
• 适用平台:ABI7500、QuantStudio系列、RocheLightCycler等主流qPCR仪器
操作流程——三步上手
1. **样本制备**:在30分钟内从EDTA抗凝全血中分离血清,使用DNA提取试剂盒即可即提即用。
2. **qPCR体系**:将18μL的预混液和2μL的模板(10ng/μL)混合,并使用石蜡油进行封闭以防蒸发。
3. **程序运行**:设置qPCR参数为95℃ 2分钟,接着进行(95℃ 15秒 → 56℃ 1分钟 → 72℃ 30秒)×40次,在72℃时采集荧光。
数据分析——轻松获得绝对拷贝数
本试剂盒自动生成3点梯度的标准品,从而形成线粒体与内参双标准曲线。校正品将计算批次校正系数K2,一键修正使结果更为精准,并通过样本的Ct值代入方程,轻松获得细胞或每毫升血清中的mtDNA拷贝数。
应用场景
• **衰老与长寿研究**:评估线粒体功能衰退的趋势。
• **肿瘤液体活检**:检测循环游离mtDNA,为早期诊断与疗效监测提供支持。
• **代谢性疾病**:探讨糖尿病、心血管病等与mtDNA拷贝数变化的关系。
• **药物毒理**:监测药物对mtDNA的影响,以优化安全性评价。
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