技术方案与应用案例

一、产品介绍

南京赛泓瑞生物科技有限公司所提供的永生化小鼠肝枯否细胞（Kupffer细胞）是一个高度可靠的体外模型，广泛应用于肝脏炎症反应及肝脏疾病的病理机制研究。这一产品为研究人员提供了重要的实验工具，助力于深入理解肝脏健康与疾病之间的关系。

二、实验方法

我们在南京赛泓瑞生物科技有限公司的实验室中使用了永生化小鼠肝枯否细胞进行了一系列实验。细胞在含有10%胎牛血清和1%青霉素/链霉素的DMEM培养基中，于37°C、5% CO2的条件下培养。待细胞生长至80-90%汇合时，使用0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液进行消化，并按1:4的比例进行传代。实验所用药物用DMSO溶解并配制成不同浓度的储存液，存放于-20°C。

接着，将细胞接种于96孔板，每孔大约接种5×10^3个细胞。24小时后，移除培养基，加入含有不同浓度药物的新鲜培养基，实验分为对照组（仅DMSO）和实验组（不同药物浓度），每组设6个复孔。药物处理24小时后，向每孔中添加20µL的5 mg/mL MTT溶液，并在培养箱中继续培养4小时。随后，移除MTT溶液，为每孔加入150µL DMSO，震荡10分钟使甲臜晶体溶解。最后，使用酶标仪在570nm波长测量样品的吸光度（OD值）。此外，在药物处理后24小时，收集细胞培养上清液，并按照ELISA试剂盒说明书检测TNF-α和IL-6的含量。数据分析使用GraphPad Prism软件，组间比较采用单因素方差分析（ANOVA）后进行Tukey’s多重比较检验。实验结果以平均值±标准差（SD）表示，P值小于0.05被视为具有统计学意义。为确保结果可靠，所有实验至少重复三次。

三、实验结果

在我们的实验中，与对照组相比，实验组中的永生化小鼠肝枯否细胞显示出明显降低的细胞活力（P<0.05）及增加的TNF-α和IL-6水平（P<0.05），这表明所测药物可能具有抗炎作用。这样的结果为研究药物在肝脏炎症中的潜在应用提供了支持。

四、结语

南京赛泓瑞生物科技有限公司提供的永生化小鼠肝枯否细胞，为肝脏炎症研究提供了稳健的实验平台。我们的应用案例表明，该产品在药物筛选及炎症机理的研究中发挥着重要作用。我们期待与各位科研工作者携手合作，通过产品的应用推动肝脏疾病研究的进一步发展。带着人生就是博-尊龙凯时的信念，我们共同探索生物医疗的未来。