人生就是博-尊龙凯时提供的人非小细胞肺癌细胞HCC-827的培养指南旨在帮助科研人员有效开展细胞培养实验。以下是详细的细胞培养条件、处理步骤及注意事项。

一、细胞培养条件

- **细胞名称**：HCC-827
- **细胞类型**：人非小细胞肺癌细胞
- **生长特性**：贴壁生长
- **冻存条件**：使用无血清冻存液（货号：C7001）
- **培养体系**：1640培养基 + 10% FBS
- **传代建议**：首次传代建议比例为1:2，每2天更换培养液。

在培养中可以用无菌离心管收集培养基，用于后续对比实验。如果对比效果未达预期，建议直接选购我们的完全培养基，以确保最佳实验效果。

二、细胞处理步骤

1. 收到细胞后的处理

收到细胞后，待细胞状态良好时，加入完全培养液并封闭瓶口，这样可有效保障细胞运输质量。使用75%酒精对细胞瓶表面进行消毒后，将细胞放入超净台进行严格的无菌操作。接着，将细胞瓶静置于37℃、5% CO2的培养箱中3-4小时，以便细胞恢复稳定状态。建议观察细胞生长情况并拍照存档，前三天的照片将作为售后支持的重要证据。

2. 细胞传代步骤

- **传代条件**：如果细胞汇合度未超过80%，请将培养基收集至离心管，留下5ml培养基于37℃培养；若细胞密度超过80%，可进行传代。
- **具体步骤**： 1. 弃去培养上清，使用无钙、镁PBS润洗细胞1-2次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶，约1-2ml至培养瓶，置于37℃培养箱消化1-2分钟，观察细胞情况。若细胞脱落，将其轻敲后加5ml完全培养基终止反应。
3. 将细胞悬液吸出并转移至15ml离心管，1000RPM离心5分钟，随后弃去上清并加入1-2ml完全培养基重悬。
4. 按1:2比例分装细胞至两个T25瓶中，补充至5-8ml完全培养基，并放入37℃、5% CO2的培养箱中继续培养。

3. 细胞冻存步骤

- 当细胞覆盖培养瓶的80%时： 1. 弃去培养液，用PBS清洗细胞一次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶约1ml，待细胞回缩变圆后加入5ml培养基终止消化。
3. 将悬液转移至15ml离心管，1000RPM离心5分钟，弃上清。
4. 用1ml雅吉生物无血清冻存液（货号：C7001）混合，加入冻存管中，并将冻存细胞放入-80℃冰箱中保存，24小时后可转至液氮储存。

4. 细胞复苏步骤

1. 从液氮中取出冻存管，迅速放入37℃水浴解冻，擦拭外壁消毒。
2. 细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中，1000RPM离心5分钟。
3. 弃上清，重悬于5ml完全培养基中，然后接种至T25培养瓶，放于37℃、5% CO2培养箱中。
4. 第二天更换新鲜的完全培养基继续培养。

三、注意事项

在细胞培养过程中，某些细胞可能会因运输而脱落。若发生此情况，请收集所有培养液至离心管并按照上述步骤进行细胞重悬和传代操作。确保培养环境的无菌性及操作的规范性是细胞生长的关键。

四、售后条款

1. **细胞问题重发标准**： - 若运输过程中细胞发生丢失、瓶破损等，合乎重发条件。
- 对于收到后48小时内出现污染的情况，提供实验结果可投重发。
- 细胞在特定情况下未存活，需提供清晰照片以申请重发。

2. **细胞问题不重发情况**： - 由客户自身操作不当造成的细胞问题不予重发。
- 未在规定时间内提供相关支持材料，视为没有售后责任。

请放心使用人生就是博-尊龙凯时的细胞产品，我们将竭诚为您提供支持和服务。